昨天下午,上海通蔚生物研究所張老師致電給我司吳,張老師表明于11月19日購買的我公司Elisa試劑盒現(xiàn)已收到貨,即將開端實驗,但是有幾個問題需求咨詢。對此上海通蔚生物技術(shù)員為客戶分析ELISA操作問題:
一、細(xì)胞上清液樣本怎么處理?
答:檢測排泄性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。經(jīng)過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
二、為什么有的試劑盒是選用比賽Elisa法?
答:小分子抗原或半抗原由于短少可作夾心法的兩個以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以選用比賽法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原比賽生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn),標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等Elisa測定多用此法。
三、用什么軟件處理Elisa檢測的數(shù)據(jù)比較好?
答:Elisa規(guī)范曲線擬合可以運(yùn)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它運(yùn)用非常便當(dāng),可以生成美麗的曲線運(yùn)用到論文之中。
問題解決后,張老師表明對我公司試劑盒的售后服務(wù)非常滿意。非常感謝上海有機(jī)研究所張老師對上海通蔚生物的支撐與信任,實驗后有成果分析等問題,也都可以隨時。
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